İki tamamlayıcı moleküler parça, hücrelerin dışarı bıraktığı küçük keseciklere protein yüklenmesini artırdı. Hakemli hücre kültürü deneyinde alıcı hücrelerde enzim etkinliği saptandı; sistem viral bir füzyon proteini kullanmadı. Bulgular, proteinlerin taşıyıcı kesecikler içinde işlevini koruyabildiğine ilişkin laboratuvar kanıtı sunuyor. Hücre içindeki serbestleşme yolu doğrudan izlenmedi; canlı hayvanlarda etkinlik veya insanlarda güvenlik sınanmadı.
Düzenlenmiş hücre dışı veziküllerle taşınan bir enzim, tek bir hakemli laboratuvar çalışmasında alıcı hücrelerde etkin kaldı. Veziküller, hücrelerin dışarı bıraktığı zarla çevrili küçük keseciklerdir. Araştırmacılar aktarımı, belirli bir DNA parçasını çıkarabilen piggyBac enzimiyle sınadı. Enzimin etkinliği, alıcı hücrelerde mCherry adlı haberci düzeneğin kırmızı floresansını artırdı.[1]
NpuN ve NpuC adlı tamamlayıcı intein parçaları, yükleme düzeneğini oluşturdu. Bir parça vezikül zarıyla ilişkili CD9 proteinine, diğeri aktarılacak yüke bağlandı. Pasif yüklemeyle karşılaştırıldığında protein yüklemesi yaklaşık 1,3 kat arttı. Deneyler, insan kökenli laboratuvar hücre hattı HEK293T ile ve viral VSV-G füzyon proteini kullanılmadan yapıldı.[1]
Kalıcı olarak düzenlenmiş üretici hücre hatları, geçici olarak değiştirilmiş hücrelerden daha iyi sonuç verdi. Geçici DNA aktarımı, plazmit DNA’sının da veziküllere girmesine yol açabiliyor; bu da alıcıdaki floresansın yorumlanmasını güçleştiriyor. Kalıcı hücre hatları, araştırmacıların etkin protein aktarımını taşınan DNA’nın başlattığı protein üretiminden ayırmasına yardımcı oldu.[1]
Elektron mikroskobuyla veziküllerin şekli, ışık saçılmasıyla boyut dağılımı incelendi. Yapay olarak düzenlenen CD9 bağlantılı belirteç kullanıldığından doğal vezikül belirteçleriyle doğrulama sınırlı kaldı. Proteinin serbestleştiği yer ve hücre içi bölmelerden kaçışı doğrudan izlenmedi. Doku hedefleme, canlı hayvanda etkinlik ve insanlarda bağışıklık güvenliği deneyin kapsamında yer almadı.[1]
